Chemiluminescence Immunoassay หรือ CLIA เป็นเทคนิคการตรวจภูมิคุ้มกันที่มีความไวสูง
1. หลักการ
การวิเคราะห์ภูมิคุ้มกันแบบเคมีเรืองแสงเป็นการผสมผสานระหว่างความจำเพาะของการตอบสนองภูมิคุ้มกันและความไวสูงของเคมีเรืองแสง หลักการพื้นฐานคือการผสมผสานการตอบสนองภูมิคุ้มกันเฉพาะระหว่างแอนติเจนและแอนติบอดีเข้ากับปฏิกิริยาเคมีเรืองแสง โดยเฉพาะอย่างยิ่ง แอนติเจนในตัวอย่างที่จะทดสอบจะรวมเข้ากับแอนติบอดีเฉพาะเพื่อสร้างคอมเพล็กซ์ภูมิคุ้มกัน จากนั้นผ่านปฏิกิริยาเคมีชุดหนึ่ง คอมเพล็กซ์ภูมิคุ้มกันจะสร้างสัญญาณเคมีเรืองแสง ความเข้มของการเรืองแสงจะแปรผันตามความเข้มข้นของแอนติเจนที่จะทดสอบ และสามารถวิเคราะห์เนื้อหาของแอนติเจนที่จะทดสอบในเชิงปริมาณได้โดยการตรวจจับความเข้มของการเรืองแสง
2. ส่วนประกอบหลัก
แอนติบอดี: รวมถึงแอนติบอดีจับและแอนติบอดีตรวจจับ แอนติบอดีจับมักจะถูกตรึงบนตัวพาเฟสแข็งเพื่อจับแอนติเจนที่จะทดสอบ แอนติบอดีตรวจจับจะรวมกับเครื่องหมายเคมีเรืองแสงเพื่อตรวจจับแอนติเจนในคอมเพล็กซ์ภูมิคุ้มกัน
ตัวพาเฟสแข็ง: เช่น ไมโครเพลท ลูกปัดแม่เหล็ก ฯลฯ ใช้ในการตรึงแอนติบอดีเพื่ออำนวยความสะดวกต่อปฏิกิริยาภูมิคุ้มกัน และการแยกและการล้าง
เครื่องหมายเคมีเรืองแสง: โดยทั่วไปคือสารที่สามารถสร้างสัญญาณเรืองแสงในปฏิกิริยาเคมี เช่น ลูมินอล แอคริดิเนียมเอสเทอร์ เป็นต้น เครื่องหมายจะรวมตัวกับแอนติบอดีในการตรวจจับเพื่อสร้างสัญญาณเคมีเรืองแสงหลังจากปฏิกิริยาภูมิคุ้มกัน
ระบบตรวจจับ: ประกอบด้วยอุปกรณ์ต่างๆ เช่น เครื่องตรวจจับการเรืองแสง ซึ่งใช้ตรวจจับความเข้มของสัญญาณเคมีเรืองแสงและแปลงสัญญาณดังกล่าวให้เป็นค่าที่อ่านได้
3. คุณสมบัติ
ความไวสูง: สามารถตรวจจับสารทดสอบที่มีความเข้มข้นต่ำมาก ซึ่งโดยปกติจะมีความไวมากกว่าวิธีการตรวจภูมิคุ้มกันแบบดั้งเดิมหลายเท่า
ช่วงเชิงเส้นกว้าง: สามารถวัดเนื้อหาของสารทดสอบได้อย่างแม่นยำในช่วงความเข้มข้นที่กว้างโดยไม่ต้องเจือจางหลายครั้ง
ความจำเพาะที่แข็งแกร่ง: อาศัยการจับกันอย่างจำเพาะของแอนติเจนและแอนติบอดี จึงมีความเลือกสรรสารทดสอบเฉพาะอย่างสูง
รวดเร็ว: กระบวนการตรวจจับค่อนข้างรวดเร็วและโดยทั่วไปสามารถรับผลลัพธ์ได้ในเวลาที่สั้นลง
ระดับความอัตโนมัติสูง: เหมาะสำหรับการตรวจจับตัวอย่างขนาดใหญ่และสามารถใช้ร่วมกับเครื่องมืออัตโนมัติเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการตรวจจับ
4. พื้นที่การใช้งาน
การวินิจฉัยทางคลินิก: ใช้ในการตรวจหาไบโอมาร์กเกอร์ต่างๆ เช่น เครื่องหมายเนื้องอก ฮอร์โมน เครื่องหมายโรคติดเชื้อ ฯลฯ เพื่อให้มีพื้นฐานสำคัญสำหรับการวินิจฉัยโรค การติดตามการรักษาและการประเมินการพยากรณ์โรค
การพัฒนายา: ใช้ในการติดตามความเข้มข้นของยา การประเมินประสิทธิผล และการวิจัยการเผาผลาญยา
การทดสอบความปลอดภัยของอาหาร: การตรวจจับสารอันตราย สารตกค้างของยาฆ่าแมลง สารตกค้างของยาสำหรับสัตว์ ฯลฯ ในอาหาร
การติดตามสิ่งแวดล้อม: การตรวจจับสารมลพิษและสารพิษในสิ่งแวดล้อม